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我國土榨花生油黃曲霉毒素B1 及圓弧偶氮酸毒素污染調查

發布日期:2021-08-20 15:26來源:中國油脂作者:楊博磊,張秀娟,點擊次數:

收稿日期:2019-12-09;修回日期:2020-02-11

基金項目:國家花生產業技術體系(CARS-13);“十三五”國家重點研發計劃重點專項(2017YFC1600900)

作者簡介:楊博磊(1988),男,助理研究員,碩士,研究方向為農產品質量與安全(Email)yanbo856@163.com。

通信作者:劉陽,研究員,博士生導師(Email)liuyangg@hotmail.com。油脂安全

DOI: 10.12166/j.zgyz.1003-7969/2020.09.007


我國土榨花生油黃曲霉毒素B1 及圓弧偶氮酸毒素污染調查

楊博磊,張秀娟,王剛,張晨曦,耿海榮,李麗,劉陽

(中國農業科學院 農產品加工研究所,農業部農產品加工綜合性重點實驗室,北京 100193)

摘要:為了解我國土榨花生油中黃曲霉毒素B1(AFB1)和圓弧偶氮酸(CPA)的污染狀況,采集全國12省20市小作坊生產的土榨花生油126份,購買市售品牌花生油27份,采用高效液相色譜法檢測花生油中AFB1和CPA兩種真菌毒素的含量。結果表明:27份品牌花生油未檢出AFB1和CPA;126份土榨花生油中,AFB1檢出率為44.44%,超標率為11.11%,CPA檢出率為7.14%,其中河南、福建、廣西和山東土榨花生油AFB1污染較為嚴重。我國土榨花生油存在真菌毒素污染安全隱患,監管部門應嚴格把控原料及加工環節,確保土榨花生油的質量和安全。

關鍵詞:土榨花生油;黃曲霉毒素B1;圓弧偶氮酸;真菌毒素

中圖分類號:TS227;R155.5文獻標識碼:A

文章編號:1003-7969(2020)09-0034-05


Investigation of aflatoxin B1 and cyclopiazonic acid in bulk peanut oil in China

YANG Bolei, ZHANG Xiujuan, WANG Gang, ZHANG Chenxi,

GENG Hairong, LI Li, LIU Yang

(Key Laboratory of Agro-products Processing, Ministry of Agriculture, Institute of Food Science and Technology,

Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100193, China)

Abstract:In order to investigate the contamination of aflatoxin B1 (AFB1) and cyclopiazonic acid (CPA) in peanut oil in China, 126 bulk peanut oil samples were collected from individual workshop in 20 cities of 12 provinces of China, and 27 brand peanut oil samples were purchased from market. The contents of AFB1 and CPA in peanut oil were detected by HPLC. The results showed that AFB1 and CPA were not detected in 27 brand peanut oil samples. Among 126 bulk peanut oil samples, AFB1 detection rate, AFB1 exceeding rate and CPA detection rate were 44.44%, 11.11% and 7.14% respectively. AFB1 contamination of bulk peanut oil in Henan, Fujian, Guangxi and Shandong was more serious. There were potential safety hazards of mycotoxin contamination in bulk peanut oil in China, so supervision department should strictly control the quality of peanut and the link of processing to ensure the safety and quality of bulk peanut oil.

Key words:bulk peanut oil; AFB1; cyclopiazonic acid; mycotoxin


隨著生活水平的提高,我國居民對植物油的人均年需求從20世紀80年代的2.2 kg提升到了2016年的24.8 kg,其中花生油占植物油的8%\[1\]。我國是世界第一大花生生產國,年產量達1 700萬t左右,其中52%左右的花生用于榨油,約占我國自產植物油的25%\[2\]?;ㄉ秃胸S富的不飽和脂肪酸,其中的油酸可在不破壞對健康有利的高密度脂蛋白膽固醇的同時降解對健康有害的總膽固醇和低密度脂蛋白膽固醇\[3\],同時油酸還具有提高自身免疫力、預防肥胖、抗炎癥、預防衰老、預防動脈粥樣硬化等作用\[4-5\],但花生油存在的安全問題不容忽視。目前,花生油存在的主要安全問題為黃曲霉毒素B1(AFB1)超標。王君等\[6\]通過對我國部分食品中AFB1監測發現,花生為AFB1污染的主要原料。AFB1是由黃曲霉和寄生曲霉產生的有毒次級代謝產物,具有很強的致癌性、致畸性和致突變性\[7\]。AFB1的主要靶器官是肝臟,攝入AFB1可引起肝炎、肝硬化,嚴重時甚至引發肝癌\[8\],被世界衛生組織國際癌癥研究機構劃定為最強致癌物之一\[9\]。圓弧偶氮酸(Cyclopiazonic acid,CPA)是由黃曲霉產生的另一種有毒代謝產物,早在1985年Rao等\[10\]就報道了由CPA引起的人類真菌毒素中毒的安全問題。CPA可引起大鼠的肝、腎臟及免疫系統損傷。由于CPA與黃曲霉毒素(AFT)同時存在,CPA的毒性往往被AFT中毒掩蓋,未能引起人們的重視\[11-12\]。目前,國內外對CPA的致病性研究尚未成熟,相關組織尚未頒布CPA限量標準。本文從全國12省20市小作坊生產的土榨花生油及市售品牌花生油開展花生油AFB1和CPA含量分析,以了解不同地區土榨花生油和不同品牌花生油中真菌毒素污染情況,為花生油安全監督提供科學依據,為群眾理性選擇花生油提供參考。

1材料與方法

1.1實驗材料

1.1.1原料與試劑2018年10—12月在全國12省20市共采集土榨花生油126份,從商城購買品牌花生油27份。樣品采集后4 ℃保存,采樣后1月內完成AFB1和CPA含量檢測。甲醇和乙腈,色譜純,美國Fisher公司;AFB1和CPA標準品,青島普瑞邦生物工程有限公司;PBS緩沖液,北京索萊寶科技有限公司;黃曲霉毒素免疫親和柱,中檢環貿生物技術(北京)有限公司;碳酸氫鈉、正己烷、氯化鉀、鹽酸、氯仿、乙酸銨等,均為分析純。

1.1.2儀器與設備安捷倫1260高效液相色譜儀,美國Agilent公司;Genius 3渦旋混合器,德國IKA公司;HF2500光化學衍生器,北京華安麥科生物技術有限公司;Angel氮吹儀,杭州奧盛儀器有限公司;高速離心機,美國Sigma公司;YP3002電子天平,上海越平科學儀器有限公司。

1.2實驗方法

1.2.1花生油中AFB1和CPA提取及測定

1.2.1.1AFB1的提取及測定根據GB 5009.22—2016《食品安全國家標準 食品中黃曲霉毒素B族和G族的測定》做適當調整。稱取5 g花生油樣品于50 mL離心管中,加入15 mL 84%乙腈,渦旋混勻,置于超聲波中超聲30 min,濾紙過濾收集濾液,備用。取2 mL提取液利用黃曲霉毒素免疫親和柱提取AFB1,用0.5 mL甲醇洗脫AFB1兩次,氮吹儀吹干,用1 mL 70%甲醇復溶,過0.22 μm濾器,收集濾液于液相瓶中,待高效液相色譜儀檢測AFB1含量。HPLC條件:Agilent TC-C18色譜柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),柱溫30 ℃;流動相為70%甲醇,流速1 mL/min;進樣量20 μL;激發波長360 nm,發射波長440 nm;配備光化學衍生器。

1.2.1.2CPA的提取及測定取5 g花生油樣品,加入20 mL甲醇-2%碳酸氫鈉水溶液(體積比7∶ 3),大于200 r/min振蕩30 min,取出10 mL溶液至分液漏斗,并加入20 mL正己烷萃取,振蕩分層后棄去正己烷層,隨后加入10 mL 10%氯化鉀溶液,混合均勻后加入0.4 mL 6.0 mol/L 鹽酸溶液酸化,用10 mL氯仿提取兩次CPA,收集氯仿層,取1 mL用氮氣吹干后復溶于1.0 mL乙腈-0.05 mol/L乙酸銨水溶液(體積比8∶ 2,pH=5),用高效液相色譜儀檢測CPA含量\[13\]。HPLC條件:Agilent TC-C18色譜柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),柱溫30 ℃;流動相為乙腈-0.05 mol/L乙酸銨水溶液(體積比8∶ 2,pH=5),流速0.6 mL/min,進樣量20 μL;檢測波長284 nm。

1.2.2數據處理根據GB 2761—2017《食品安全國家標準 食品中真菌毒素限量》規定,花生油樣品中AFB1含量大于20 μg/kg,視為超標;由于我國尚未頒布CPA限量標準,因此本次調查只做檢出分析。采用Excel 2010和SPSS 17統計軟件分析數據。

2、結果與討論

2.1花生油中真菌毒素總體污染情況(見表1)

表1   153份花生油樣品中真菌毒素污染情況

1.png

注:AFB1檢出限為1 μg/kg,CPA檢出限為10 μg/kg。

由表1可知:153份花生油樣品中,56份樣品檢出AFB1,檢出率為36.60%,含量范圍為1.12~5563 μg/kg,中位數為5.96 μg/kg,14份樣品檢出AFB1超標,超標率為9.15%;9份樣品檢出CPA,檢出率為5.88%,含量范圍為24.28~1 05421 μg/kg,中位數為299.01 μg/kg。國內學者針對不同地區花生油AFB1污染也開展了一系列調查。徐文靜等\[14\]對四川、廣西、云南等8省216份花生油AFB1污染進行調查,結果顯示AFB1的檢出率為5741%,超標率為11.57%。殷國英等\[15\]對廣東惠州126份花生油AFB1污染進行調查,發現AFB1檢出率達88.1%,超標率為11.9%。周子焱等\[16\]對浙江省345份花生油進行AFB1監測,發現AFB1檢出率為5.2%,未檢測到AFB1超標樣品。何建忠等\[17\]對廣西貴港市459份花生油AFB1進行監測,發現AFB1檢出率達12.9%,超標率為6.8%。駱建祥等\[18\]對福建惠安縣花生油AFB1進行監測,發現AFB1超標率為132%。何景等\[19\]對北京市食用油AFB1進行監測,發現花生油中AFB1檢出率為26.67%。綜上所述,我國各地均存在花生油AFB1污染情況,形勢不容樂觀,應引起監管部門重視。由于國家尚未頒布CPA限量標準,國內尚未開展花生油中CPA監測,但其對器官、神經系統、免疫系統同樣存在較強毒性,仍需引起關注。

2.2不同類別花生油中真菌毒素污染情況(見表2)

表2不同類別花生油中真菌毒素污染情況

2.png

由表2可知:56份土榨花生油檢出AFB1,檢出率為44.44%,14份土榨花生油AFB1超標,超標率為11.11%,9份土榨花生油檢出CPA,檢出率為714%;品牌花生油中未檢出AFB1和CPA。土榨花生油AFB1和CPA污染情況顯著高于品牌花生油。宋博才\[20\]對部分市售品牌花生油和土榨花生油品質調查發現,品牌花生油質量合格,而土榨花生油AFB1含量超標率較高。陳濤\[21\]對福建省市售品牌花生油和土榨花生油黃曲霉毒素污染監測發現,土榨花生油黃曲霉毒素含量均高于品牌花生油。劉輝等\[22\]研究發現,土榨花生油AFB1超標率高于品牌花生油。土榨花生油一般都為小作坊或者非正規廠家生產,儲藏加工環境較差,容易引起花生黃曲霉菌生長并產生毒素,同時由于小作坊加工工藝比較落后,生產人員技術水平相對較低,缺乏去除黃曲霉毒素的加工工藝,因此造成了土榨花生油黃曲霉毒素污染嚴重的情況。監管部門應加強花生黃曲霉毒素防控宣傳,提高加工人員安全意識,加強監管力度,避免黃曲霉毒素污染花生油流入市場。

2.3不同地區土榨花生油中AFB1污染情況(見表3)

表3不同地區土榨花生油中AFB1污染情況

3.png

由表3可知,河南、福建、廣西和山東土榨花生油AFB1污染較為嚴重,檢出率分別為55.17%、6364%、53.33%和40.00%,且均檢出AFB1超標樣品,4個省份土榨花生油中AFB1檢出最高值達到國標限值的1.76~2.78倍,其中廣西檢出土榨花生油中AFB1最高含量為55.63 μg/kg。田洪蕓等\[23\]對山東地區土榨花生油進行監測發現,AFB1檢出率達80.00%,超標率為19.10%。盧宇芳等\[24\]對廣西地區植物油中AFB1進行監測發現,土榨花生油中AFB1超標率為18.18%。林強等\[25\]對福州市小作坊花生油進行AFB1污染情況分析發現,AFB1超標率達66.1%。以上研究表明各地土榨花生油AFB1污染嚴重。本調查研究發現,全國各地花生油AFB1污染不容樂觀,河南、山東、廣西和福建更為嚴重。分析其原因可能為:河南、山東兩省為花生種植大省,原料儲藏充足,而小作坊環境衛生及通風情況較差,容易造成黃曲霉菌生長和產毒;廣西、福建兩地氣候濕熱,更易造成黃曲霉毒素污染。

2.4不同地區土榨花生油中CPA污染情況(見表4)

表4不同地區土榨花生油中CPA污染情況

4.png


由表4可知,湖北、湖南、山西、山東、廣西和福建6省土榨花生油中均檢出CPA,檢出率分別為2143%、25.00%、20.00%、6.67%、6.67%和455%。土榨花生油中CPA最高檢出含量為1 054.21 μg/kg,最低檢出含量為24.28 μg/kg。土榨花生油中CPA的污染情況遠輕于AFB1,僅個別省份少量檢出,檢出率最高的為湖南,檢出率為2500%,檢出份數為2份;湖北檢出率為21.43%,檢出份數為3份;其他省僅檢出1份。Oliveira等\[26\]研究了巴西圣保羅市的牛奶中黃曲霉毒素M1(AFM1)和CPA的污染情況,發現牛奶中AFM1的檢出率為77.1%,而CPA的檢出率遠低于AFM1,僅為4.2%,此結果與本研究結果類似。目前,國內外對花生產品中CPA的污染調查以及CPA和AFB1污染相關性研究較少。本次研究發現土榨花生油中AFB1污染與CPA污染無顯著相關性。

     3結論通過對我國土榨花生油及市售品牌花生油中AFB1和CPA污染調查發現:品牌花生油未檢出AFB1和CPA污染;土榨花生油存在真菌毒素污染安全隱患,AFB1檢出率為44.44%,超標率為1111%,CPA檢出率為7.14%,其中河南、福建、廣西和山東土榨花生油AFB1污染嚴重,個別省份土榨花生油檢出CPA污染。土榨花生油一般由小作坊生產,小作坊衛生環境相對較差,防霉防潮措施不到位,容易引起花生黃曲霉毒素污染。為全面提高土榨花生油質量安全,建議監管部門加大對花生原料及土榨花生油生產、流通環節的監管,加大對黃曲霉毒素危害的宣傳力度,加強對花生油加工作坊生產人員安全培訓。本次污染調查雖在各省市采集樣品較少,覆蓋不夠全面,但在一定程度上能夠體現我國土榨花生油和品牌花生油的質量狀況。

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